无菌检查法

LinBB

硫乙醇酸盐流体培养基在培养过程中被氧化了，变色了。怎么办？怎么解决？有在使用前水浴加热…

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lyluo922

硫乙醇酸盐流体培养基
胰酪胨15. 〇g 氯化钠2. 5g
酵母浸出粉5. 0g 新配制的0 .1%
葡萄糖/无水葡萄糖5. 5g/5. 0g 刃天青溶液1. 0ml
L-胱氨酸0. 5g 琼脂0. 75g
硫乙醇酸钠0. 5g 水1000ml
(或硫乙醇酸） (0. 3ml)
除葡萄糖和刃天青溶液外，取上述成分混合，微温溶解，
调节PH 为弱碱性，煮沸，滤清，加人葡萄糖和刃天青溶
液，摇匀，调节pH, 使灭菌后在25°C 的pH值为7.1 土0.2。
分装至适宜的容器中，其装量与容器高度的比例应符合培养
结束后培养基氧化层（粉红色）不超过培养基深度的1/2。灭
菌。在供试品接种前，培养基氧化层的高度不得超过培养基
深度的1 / 3 , 否则，须经100°C水浴加热至粉红色消失（不超
过2 0 分钟），迅速冷却，只限加热一次，并防止被污染。
除另有规定外，硫乙醇酸盐流体培养基置30 35°C培养。

LinBB

lyluo922 发表于 2020-12-04 15:37
硫乙醇酸盐流体培养基
胰酪胨15. 〇g 氯化钠2. 5g
酵母浸出粉5. 0g 新配制的0 .1%
葡萄糖/无水葡萄糖5. 5g/5. 0g 刃天青溶液1. 0ml
L-胱氨酸0. 5g 琼脂0. 75g
硫乙醇酸钠0. 5g 水1000ml
(或硫乙醇酸） (0. 3ml)
除葡萄糖和刃天青溶液外，取上述成分混合，微温溶解，
调节PH 为弱碱性，煮沸，滤清，加人葡萄糖和刃天青溶
液，摇匀，调节pH, 使灭菌后在25°C 的pH值为7.1 土0.2。
分装至适宜的容器中，其装量与容器高度的比例应符合培养
结束后培养基氧化层（粉红色）不超过培养基深度的1/2。灭
菌。在供试品接种前，培养基氧化层的高度不得超过培养基
深度的1 / 3 , 否则，须经100°C水浴加热至粉红色消失（不超
过2 0 分钟），迅速冷却，只限加热一次，并防止被污染。
除另有规定外，硫乙醇酸盐流体培养基置30 35°C培养。

是接种完，培养过程中被氧化…你给我的这些我都知道……

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lyluo922

长菌没有？

凉风

培养过程中氧化你难道还想怎么搞？确认氧化程度，是否在合理范围内，不行的话就重做。培养的时候没有封好么？

LinBB

凉风 发表于 2020-12-04 16:03
培养过程中氧化你难道还想怎么搞？确认氧化程度，是否在合理范围内，不行的话就重做。培养的时候没有封好么？

第一次做，没人带，实验室只有我一个人

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LinBB

lyluo922 发表于 2020-12-04 15:46
长菌没有？

没有长菌……

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zh11314

氧化是个什么现象？   氧化层变大了？

LinBB

zh11314 发表于 2020-12-04 16:16
氧化是个什么现象？   氧化层变大了？

整个氧化了……

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loveecoli

没密封好吧，培养过程中不要随意晃动

lyluo922

LinBB 发表于 2020-12-4 16:12
没有长菌……

1、要是密封好了，培养时间也足够，这就很难解释了
2、可能没密封好，培养过程中受到污染，但培养条件还不足

zh11314

LinBB 发表于 2020-12-4 16:19
整个氧化了……

那也只能是在空气中暴露的时间长了或者摇晃多了

lxiaof

瓶塞筛好，装量少一点

昀亦然

谢谢分享和整理，值得学习

果然12

楼主的问题有点不太理解，培养基的问题配置后需要在验证有效期的额，培养过程氧化，就是方法学验证过程中出现的问题，或者操作过程中出现的问题

依然星期三

密封性不行吧

小金库

非常感谢分享