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细胞因子曾被称为淋巴因子或单核因子，最早是从淋巴细胞和单核细胞中发现的。细菌病毒等微生物及物理化学因素对机体的损坏都可以激发细胞因子的产生，而细胞因子又能杀灭细菌和抑制病毒达到保护机体的目的。细胞因子检测具有重要的实验室研究价值，是判断机体免疫功能的重要指标，常采用的方法有细胞病变抑制法、免疫学检测法和分子生物学等方法。
对于细胞因子检测，常用的方法有如检测单个细胞特定细胞因子的表达手段的ELISA、ELIspot、原位杂交、免疫细胞化学、限制性稀释分析（limiting dilution analysis，LDA）和单细胞PCR等生物分析技术；还有采用抗细胞因子抗体与细胞表面或胞内特定亚群标志组合来检测不同细胞亚群细胞因子的流式细胞仪和同时对单个样品中的多个指标进行检测的微量样本多重蛋白定量（CBA）技术。
1、流式细胞术
流式细胞术生物分析技术的突出特点是在单个细胞水平进行测定，可在同一细胞内同时检测两种或更多种细胞因子，可根据细胞免疫表型区分不同的细胞亚群，进行多参数相关分析。 与传统的荧光镜检相比，流式细胞术具有速度快、精度高、准确性好等优点，可以高速分析上万个细胞，并能同时从一个细胞中测得多个参数，成为当代先进的细胞定量分析技术。目前流式细胞术（FCM）仪器和方法的日臻完善，它的应用范围也日益广泛，现已普遍用于免疫学、血液学、肿瘤学、细胞生物学、细胞遗传学和生物化学等临床医学和基础医学研究领域。
随着单克隆抗体的发展，以及流式细胞仪检测方法的不断完善，采用流式细胞术不但可以对细胞表面的抗原和受体进行分析，对细胞内的抗原或分子也可以进行检测。现在细胞微球试验(CBA)技术的出现，使得流式细胞仪可以检测血清、血浆、培养液上清或其他体液中可溶性蛋白和细胞因子.
2、Bio-Plex 生物分析技术
Bio-Plex悬液芯片系统将先进的软件包、系统检验工具、微球耦联试剂和即用型细胞因子与磷酸化蛋白测试试剂整合在一起，使硬件、软件和检测试剂形成一个功能强大的芯片技术平台，大大提高了结果的精确性和可重复性，使用更加简便高效。该系统为蛋白与核酸研究人员提供了灵活的复合测试方案，可在单个样品中同时分析多达100个生物分子。利用100种不同颜色微球（xMAP技术）标记生物分子配体，每个微球可耦联一个对应不同靶分子的特异反应物。
3、MSD
MSD电化学发光检测技术使用SULFO-TAGTM标记物。在MULTI-ARRAY和MULTI-SPOT微孔板的电极表面通电后，电化学作用激发SULFO-TAGTM标记物发出强光。MSD通过点阵技术，在96孔石墨电极板里可实现10个指标每孔的检测。也可在24孔板里定制实现100指标每孔的筛选检测。满足了不同的实验需求。在样本用量上，无论单指标或多指标都只需≤25ul的样本，即可完成检测。美迪西的生物分析实验室配备的免疫原性分析的金标准仪器——美国MSD电化学发光免疫分析仪，可以提供采用MSD平台进行单个或多个指标的细胞因子检测服务。
4、免疫生物分析技术
细胞因子均为蛋白或多肽，具有较强的抗原性。随着重组细胞因子的出现，可较方便地获得细胞因子的特异性抗血清或单克隆抗体，因此可利用抗原抗体特异性反应的特性，用免疫学技术定量检测细胞因子，常用的方法包括ELISA、RIA及WesternBlot 免疫印迹法。
尽管细胞因子种类繁多，只要获得了针对某一因子的特异性抗体（包括多克隆抗体或单克隆抗体）均可采用相似的技术开展工作。免疫学检测法可直接测定样品中特定细胞因子的含量（用ng/ml表示），为大规模检测临床病人血清中细胞因子的含量提供了方便。本法仅测定细胞因子的抗原性，与该因子活性不一定相平行，因此要了解细胞因子的生物学效应，必须结合生物学检测法。
使用不同的生物分析技术进行细胞因子检测，可能结果有些差异，且不同的检测方法各有优缺点，可以根据实验目的和实验室条件进行选择。在进行细胞因子检测时，应考虑到细胞因子的作用具有网络性的特点，需明确检测方法所测定的细胞因子成分，并考虑其抑制剂和可溶性受体的水平，将各种结合使用，有可能得到较为可靠的结果。
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发表于 2019-3-15 11:44:03
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