头孢克肟胶囊的微生物验证

薪火新茶

  有点问题想请教各位同行。目前在做头孢克肟胶囊的微生物验证，采用薄膜过滤法，冲洗液是0.1%蛋白胨水溶液，然后是取1ml加入到100ml冲洗液过滤，再用冲洗液冲洗4次（每次100ml），每块培养基平板和每瓶TSB内都有2ml青霉素酶。然后需氧菌都有长，回收率都可以，就是控制菌大肠埃希菌不长，控制菌的菌液组是正常生长的。第二次实验的时候对控制菌加大了冲洗量，设置了100+400ml，100+500ml和100+600ml的试验组，结果400ml的长了，另外两个稀释级别更高的反而没长，同时因为一些别的原因，第二次实验的大肠埃希菌的浓度是比第一次高的。请问各位能帮我分析一下会有哪些原因吗？谢谢大家了。
  有在网上查文献，有说头孢克肟对革兰阴性菌的抑菌性更强，不知是否有影响呢？

山顶洞人

想起杨过瀑布下练功，你懂了吗？

37度爱

按照你的描述无非只有两个原因了：
1、菌的对头孢的抗药性的差异。2、方法的差异：一个是平皿和TSB中都是加了2ml的酶，但是TSB中青霉素酶的浓度要比平皿低很多啊，另外一个可能就是贴膜法比滤膜直接加到TSB中培养更能减少对菌生长的干扰。
至于你说的冲洗次数的差异的话，主要原因可能是你冲洗的时候，滤杯上以及滤杯和滤膜贴合处残留的药液没有冲洗干净导致的吧。
解决方案的话：1、增加TSB中酶的量；2冲洗液中加一点酶；3、增加冲洗次数，鉴于你说的情况，增加冲洗次数的话还是算了，验证以及后期操作起来都太费劲的，而且不一定见效，还是优先考虑在TSB中多加一些酶吧。或者你可以换一个不容易残留的限度仪。

薪火新茶

37度爱 发表于 2018-2-11 15:02
按照你的描述无非只有两个原因了：
1、菌的对头孢的抗药性的差异。2、方法的差异：一个是平皿和TSB中都是 ...

谢谢您的热心解答~也有可能是我上次试验的时候有什么疏漏的地方没注意到。之后重复了两次控制菌终于长出来了~

燕长风2013

你好，头孢克肟胶囊样品是怎么制备的？内容物和囊壳是分开的吗？

薪火新茶

燕长风2013 发表于 2018-3-16 10:46
你好，头孢克肟胶囊样品是怎么制备的？内容物和囊壳是分开的吗？

我们是把一颗颗胶囊掰开，内容物加进缓冲液里，再把胶囊壳一起丢进去。听说我们这边的省所是有一个胶囊的粉碎机，粉碎之后把所有东西一起倒进缓冲液里。

戴木木

是1:10的1ml吗?2ml的酶量有多少单位?为什么加青素酶而不是头孢菌素酶?过滤大肠时，胶囊壳不会堵住滤膜而过滤不了吗？

林春雨

你好，我也在做头孢克肟胶囊的微生物验证，能否分下你的方法