微生物方法学验证

张海林

微生物计数方法适用性实验，15版药典四部第142页中，试验组操作时，“取制备好的供试液，加入试验菌液，混匀”这里应该怎么理解，是把1ml菌液加入到1:10供试液中混匀，还是吸取1ml供试液到平皿中，再加入1ml菌液在平皿中混匀呢？

战斗的蟋蟀

我的理解是先混匀在放到平面皿中

张海林

战斗的蟋蟀 发表于 2016-11-3 09:31
我的理解是先混匀在放到平面皿中

我也是这么理解的，更能模拟样品检验的过程~但是有些单位是分别吸1ml在平皿里混匀，我很疑惑

张海林

战斗的蟋蟀 发表于 2016-11-3 09:31
我的理解是先混匀在放到平面皿中

我也是这么理解的，但是很多单位的做法是分别吸取，在平皿里混匀，这样不是模拟真实的样品检验过程，对吧

战斗的蟋蟀

张海林 发表于 2016-11-3 09:38
我也是这么理解的，更能模拟样品检验的过程~但是有些单位是分别吸1ml在平皿里混匀，我很疑惑

试验组的一般是供试液中加入试验菌液，混匀，我觉得很好理解啊

张海林

战斗的蟋蟀 发表于 2016-11-3 09:53
试验组的一般是供试液中加入试验菌液，混匀，我觉得很好理解啊

我开始也是这么理解的，不过看了几个公司的方案，才有这个疑惑耶

一米2015

试验组是供试液中加入试验菌液，混匀，一般是取供试液9.9ml,0.1ml菌液混匀。然后再取1ml计数。

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药典规定“所加菌液的体积应不超过供试液体积的1%”，如果是在10mL 1:10供试液中加入菌液，菌液量是0.1mL，浓度是 100CFU 至 999CFU/0.1mL,  混匀后取1mL 到平皿。如果先取1mL 供试液至平皿，按药典规定“所加菌液的体积应不超过供试液体积的1%”，所加菌液量是10uL，菌液浓度也是浓度时是 100CFU 至 999CFU/ 10uL。很显然，10uL的量是很难控制的，而且混匀也是个问题。

希望对你有所帮助。

星晴絮语

0.1ml的菌液加至9.9ml供试品中

张海林

星晴絮语 发表于 2016-11-4 16:50
0.1ml的菌液加至9.9ml供试品中

请问，现在是要制备不超过1000cfu/ml的菌液，然后再实验对吗？

星晴絮语

张海林 发表于 2016-11-6 07:26
请问，现在是要制备不超过1000cfu/ml的菌液，然后再实验对吗？

取不超过10000cfu/ml的菌液9.9ml，加入0.1ml供试品，得到不超过100cfu/ml的菌液。

小小小罗

@云淡风轻

星晴絮语 发表于 2016-12-6 13:26
取不超过10000cfu/ml的菌液9.9ml，加入0.1ml供试品，得到不超过100cfu/ml的菌液。

反了，9.9的供试液，0.1的菌

Yangxf

不可能了吧。现在都是加到样品溶液里。不可能放在平皿里的。那是以前那么做。现在不让了。菌液体积占百分之一。在平皿里怎么做到的。

Yangxf

张海林 发表于 2016-11-6 07:26
请问，现在是要制备不超过1000cfu/ml的菌液，然后再实验对吗？

同时做啊，你又没做过菌液的保存期。

Yangxf

星晴絮语 发表于 2016-11-4 16:50
0.1ml的菌液加至9.9ml供试品中

加到10ml不是更好么，反正没超过百分之一就可以。又不一定要精确到百分之一。