琼脂培养基的配制方法

lanzhujingling · 发表于 2016-11-2 10:53:09

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请问大家做平板用的琼脂培养基都是怎么配制的？先大量加热溶解再分装灭菌，还是单独配制小瓶部分溶解后直接灭菌呢？

红茶. · 发表于 2016-11-2 10:57:44

铺在培养皿上的，你怎么灭菌？

战斗的蟋蟀 · 发表于 2016-11-2 11:00:31

灭菌后再铺皿

洁白的羽毛 · 发表于 2016-11-2 11:05:53

过去也是自己配制，是先大量加热溶解再分装灭菌。

高连海 · 发表于 2016-11-2 11:42:06

温水更好溶解，太热容易结团。大量配置后分装瓶更好，便于控制。小瓶的话工作量大而且不能保证每瓶都一样。

aiziji · 发表于 2016-11-2 13:55:43

以前配置的时候分两种情况，用于检测表面微生物的碟皿是突出的，所以这个是灭菌后再进行分装的，其他的都是分装后进行灭菌；这几年已经购买成品的无菌培养皿了

lanzhujingling · 发表于 2016-11-2 13:57:32

高连海发表于 2016-11-2 11:42
温水更好溶解，太热容易结团。大量配置后分装瓶更好，便于控制。小瓶的话工作量大而且不能保证每瓶都一样。 ...

用多少度的温水溶解呢？溶解后在分装过程中不会凝固吗？

86419405 · 发表于 2016-11-2 14:15:05

走过路过学习过

梦魂牵绕♂ · 发表于 2016-11-2 16:44:08

量小的直接称量溶解灭菌；量大加热溶解后分装灭菌再制备平板

高连海 · 发表于 2016-11-2 20:49:41

五六十度就可以，煮沸再分装肯定不会凝。

gudanxiaoai · 发表于 2016-11-4 15:33:59

最近配的营养琼脂斜面失败率很高，是怎么回事呢？？我是先配好100ml，然后用移液管抽10ml装小试管，然后灭菌，等冷切，但是有水分，不怎么凝固，但是倒培养皿的却OK。

唐爱林 · 发表于 2016-11-29 22:31:32

根据说明书的配量配制好实际所需的量，直接用量取好的纯化水溶解后，封装好三角瓶，再去按所需参数灭菌，灭好后，放置到不烫手的温度便可直接倒入培养皿中15-20毫升的量，放凉后倒置即可

chen5385973 · 发表于 2016-11-29 22:32:41

学习下。。

唐爱林 · 发表于 2016-11-29 22:37:41

gudanxiaoai 发表于 2016-11-4 15:33
最近配的营养琼脂斜面失败率很高，是怎么回事呢？？我是先配好100ml，然后用移液管抽10ml装小试管，然后 ...

换成直径30毫米的大试管，装入不超过1/3的培养基灭菌后再斜置试试，还有15版药典营养琼脂培养基已被咦酪大豆胨琼脂培养基取代了，你可以看看药典

MooMooMua · 发表于 2016-11-29 23:34:23

高连海发表于 2016-11-2 20:49
五六十度就可以，煮沸再分装肯定不会凝。

请问这位老师你们用的什么品牌的培养基

高连海 · 发表于 2016-11-30 07:02:28

MooMooMua 发表于 2016-11-29 23:34
请问这位老师你们用的什么品牌的培养基

BD的不会混，密理博的含琼脂多会混一点。灭菌时间有影响，大于121摄氏度15min以上密理博的会混。国产的海博日水的都还好。

高连海 · 发表于 2016-11-30 07:05:31

gudanxiaoai 发表于 2016-11-4 15:33
最近配的营养琼脂斜面失败率很高，是怎么回事呢？？我是先配好100ml，然后用移液管抽10ml装小试管，然后 ...

一般斜面最好放一天再用。水太多了，或者试管不够洁净，或者灭菌时间过长。适当放一两天再用你说的这种状况会少很多。

gudanxiaoai · 发表于 2016-12-2 16:40:24

高连海发表于 2016-11-30 07:05
一般斜面最好放一天再用。水太多了，或者试管不够洁净，或者灭菌时间过长。适当放一两天再用你说的这种状 ...

我们都是121°30Min 。然后取出来的时候就放，第二天我感觉很明显的分为琼脂层跟半琼脂半水层，半水层很清晰但是感觉很脆弱，不敢乱动，琼脂层又很厚实不透明

高连海 · 发表于 2016-12-2 19:09:19

gudanxiaoai 发表于 2016-12-2 16:40
我们都是121°30Min 。然后取出来的时候就放，第二天我感觉很明显的分为琼脂层跟半琼脂半水层，半水层很 ...

水不多就倒掉吧。你们绝对过热啊。你们培养基没糊味？沙氏的话得变酱油了。

凝砂 · 发表于 2016-12-2 21:52:43

gudanxiaoai 发表于 2016-12-2 16:40
我们都是121°30Min 。然后取出来的时候就放，第二天我感觉很明显的分为琼脂层跟半琼脂半水层，半水层很 ...

什么培养基需要灭那么久？

[无菌&限度检查] 琼脂培养基的配制方法