两台安捷伦HPLC图谱不一致

实验室 · 发表于 2016-8-25 15:08:06

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相同样品并在相同色谱条件下在不同HPLC上出现图谱不一致情况，如图……另外仪器均为安捷伦HPLC，只是检测器为VWD和DVD，且图谱中不一致应该不是偶然因素造成，连续进样6针可获得一致图谱，图1和图2为VWD检测器上检测同一张图，只是放大比例不一样，图3和图4为DAD同一张图，不同比例

VWD检测-1

VWD检测-2

DAD检测-1

DAD检测-2

jasonscott · 发表于 2016-8-25 15:41:20

这个问题应该是检测器的问题，DAD和VWD检测器有时候响应是存在差别的。

yjj3706 · 发表于 2016-8-25 15:18:27

会不会是柱子的问题？

pharm180 · 发表于 2016-8-25 15:21:18

柱子未清洁干净！

实验室 · 发表于 2016-8-25 15:24:36

pharm180 发表于 2016-8-25 15:21
柱子未清洁干净！

同一色谱柱，在不同仪器上不一致，更换新色谱柱现象一致

实验室 · 发表于 2016-8-25 15:25:01

yjj3706 发表于 2016-8-25 15:18
会不会是柱子的问题？

基本上可以排除柱子带来的影响

yjj3706 · 发表于 2016-8-25 15:36:48

实验室发表于 2016-8-25 15:25
基本上可以排除柱子带来的影响

已经不做QC好多年了，猜测的
控制好变量，一个一个排除吧。检测器、波长、流速、柱效甚至进样器污染都可能吧

scslk0045 · 发表于 2016-8-25 15:40:43

检查一下流动相是否有差异

gmp-qc · 发表于 2016-8-25 15:52:15

jasonscott 发表于 2016-8-25 15:41
这个问题应该是检测器的问题，DAD和VWD检测器有时候响应是存在差别的。

说的对，其实这个原因楼主已经给出了。光源不一样，精度不一样，结果肯定是有差别的

实验室 · 发表于 2016-8-25 15:57:53

gmp-qc 发表于 2016-8-25 15:52
说的对，其实这个原因楼主已经给出了。光源不一样，精度不一样，结果肯定是有差别的

是有这方面你的猜想，但是从理论上来说，光源和波长选择都是一致的，就不清楚为什么会产生差异，且现在存在差异，该怎么把这个问题调查清楚

jasonscott · 发表于 2016-8-25 16:02:33

实验室发表于 2016-8-25 15:57
是有这方面你的猜想，但是从理论上来说，光源和波长选择都是一致的，就不清楚为什么会产生差异，且现在存 ...

实际使用中确实有差别的，这个和检测器的工作原理有关系。如果有杂质对照品，可以测一下响应因子。

老男人 · 发表于 2016-8-25 16:07:00

应该是检测器的原因

实验室 · 发表于 2016-8-25 16:08:38

jasonscott 发表于 2016-8-25 16:02
实际使用中确实有差别的，这个和检测器的工作原理有关系。如果有杂质对照品，可以测一下响应因子。

分析方法验证中额外的发现，换仪器后出现此情况，随后在实验室其他VWD检测器仪器上都试验过，均未出现主峰后面的峰，按您的意思是此杂质只能DAD检测器检测出？按检测器的灵敏度来说的话有关物质检测VWD应该更强于DAD才是啊

yjjjuichin · 发表于 2016-8-25 16:44:11

泵这块也得考虑，还有死体积

truefwy · 发表于 2016-8-25 16:49:37

不同的检测器，扫描的频率不一样。

xhw520lzz · 发表于 2016-8-25 17:18:52

是不是大的色谱峰后面有一个小峰没有分离出来

黑白心1897 · 发表于 2016-9-7 22:21:02

DAD的参比波长设的多少

实验室 · 发表于 2016-9-13 14:25:07

xhw520lzz 发表于 2016-8-25 17:18
是不是大的色谱峰后面有一个小峰没有分离出来

只有这一台仪器出现这样的情况

实验室 · 发表于 2016-9-13 14:25:58

黑白心1897 发表于 2016-9-7 22:21
DAD的参比波长设的多少

参比关闭了

yugijiang · 发表于 2017-3-29 21:18:01

看一下DAD的设置是不是有问题？不过从你的图谱看DAD的分离情况要好于vwd，你最好是同一个人、同一天、同一根色谱柱、同一批流动相，反正尽可能只有仪器变化其它参数没有变来分析看看情况到底如何

[分析仪器] 两台安捷伦HPLC图谱不一致