无菌方法适用性试验讨论

絮絮冰子

无菌方法适用性试验里薄膜过滤法“在最后一次的冲洗液中加入小于100cfu的试验菌”这个大家都是怎么样操作的，无菌实验我这用的是三联套筒，加菌的过程都是套筒里面加好培养基之后拿到阳性室里面用注射器加入100cfu的试验菌

亦心

这个说的是培养基阳性实验的一个操作吧？首先你需要有<100cfu的试验菌，这个你可以拿传代的菌种通过稀释培养制得，然后按照阳性菌的操作进行就好了，但是稀释过程要反复的培养计数，要不然不能确定最后菌液的浓度，通常稀释到十的负六次方左右

絮絮冰子

hornit 发表于 2016-8-16 21:31
这个说的是培养基阳性实验的一个操作吧？首先你需要有

不是，是说无菌方法使用性试验的时候阳性菌是怎么样加的，我这公司加的方式和药典描述的不一样

wangwenji

絮絮冰子 发表于 2016-8-16 21:55
不是，是说无菌方法使用性试验的时候阳性菌是怎么样加的，我这公司加的方式和药典描述的不一样

一楼说的对啊，跟无菌检查阳性对照操作一样。

紫云花开

同上，我们也在为这个问题烦扰呢，如果在最后一次冲洗液的时候直接加菌的话，不符合环境要求，如果无菌验证在阳性做的话也不符合要求

亦心

不是这样的，首先要明白这个验证的意义，验证无菌检验方法的话，在药典中只是规定了适当的冲洗液，用来稀释被测物的浓度，特别是抗生素类产品，如果最后集菌仪里面有残留的话，就算结果无菌也不能确定确定是真的无菌，这就需要对方法进行验证。冲洗量过少，容易导致样品残留，与被测物的相互作用不能保证，无法体现或者得出真是的结果，冲洗量过大，容易引起微生物破裂，这样微生物同样不能生长，得出的依然是无菌的结论。所以需要通过验证来平衡样品残留和微生物生存。验证最后需要加的菌是耐受菌（如果没有记错的话），这个菌对该样品比较敏感，不易生长此时就需要对这个进行验证。所以最后你加入的菌要进行评估或者根据药典。然后最后要说的是加菌在阳性环境加，因为别的环境加的话首先会污染环境，其次，加菌的目的是为了证明样品已经冲洗干净，所以这个浓度一定要把握好，不能过高或者过低，以接近100CFU为宜。我只能帮你这么多了

絮絮冰子

hornit 发表于 2016-8-16 23:22
不是这样的，首先要明白这个验证的意义，验证无菌检验方法的话，在药典中只是规定了适当的冲洗液，用来稀释 ...

是说在方法验证的时候，菌是怎么样加入的，药典上是说在最后一次冲洗液中加菌，可是这个不好操作，所以我们是往已经装有培养基里面的套筒里面加菌的

亦心

絮絮冰子 发表于 2016-8-17 08:09
是说在方法验证的时候，菌是怎么样加入的，药典上是说在最后一次冲洗液中加菌，可是这个不好操作，所以我 ...

我们都是最后装有培养基里面加

絮絮冰子

hornit 发表于 2016-8-17 09:20
我们都是最后装有培养基里面加

恩，我这也是这样的，就是和药典里说的“最后一次冲洗液中加入试验菌”不一样

tiantiancw

药典这句话得看怎么理解含义。如果原封不动照做，那就是在最后一次冲洗液中加入菌液，然后过滤再注入培养基。但是有几个问题，一个是无菌环境下操作菌液风险很大；第二个是方法适用性做过后，难道以后每次检验时阳性也这么操作？不仅难以操作而且环境也没办法保证了。所以在我了解了几个厂里面，绝大部分还是过滤完成后注入培养基，然后到阳性室直接将菌液加到集菌培养器里面。

絮絮冰子

tiantiancw 发表于 2016-8-17 11:15
药典这句话得看怎么理解含义。如果原封不动照做，那就是在最后一次冲洗液中加入菌液，然后过滤再注入培养基 ...

恩，好的

小铁犇

tiantiancw 发表于 2016-8-17 11:15
药典这句话得看怎么理解含义。如果原封不动照做，那就是在最后一次冲洗液中加入菌液，然后过滤再注入培养基 ...

如果一字不落的按照药典做的话，其实是应该在阳性室里面放一个过滤器吧，把最后一次冲洗液中加入阳性菌株，过滤

云儿宝宝7

jiazhang33 发表于 2020-12-8 14:26
如果一字不落的按照药典做的话，其实是应该在阳性室里面放一个过滤器吧，把最后一次冲洗液中加入阳性菌株 ...

好像也只能这样才能做到药典规定呢

junqcq

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