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楼主: 夏慕慕
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[质量控制QC] 纯化水长菌

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发表于 2016-6-23 20:46:39 | 显示全部楼层
桃花酒仙 发表于 2016-6-22 22:47
别忽悠楼主,灭30分钟的培养基你做过适用性没?会影响回收率的

想加个好友的,以后多讨论下的,妹的,这还软件还要加好友的权限……
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发表于 2016-6-26 09:38:23 | 显示全部楼层
不知道楼主是否找到答案?能否分享一下?
如果觉得是培养基问题可将灭菌出来的培养基直接放入培养箱培养无需再倾倒平皿了,
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药徒
发表于 2016-6-26 16:14:09 | 显示全部楼层
也可能纯化水样品被污染了呢
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发表于 2016-6-27 13:42:43 | 显示全部楼层
咨询一下培养基厂家,开过瓶的干粉怎么保存和保存期。我们一般是封口后放2-8℃。
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药徒
发表于 2016-6-27 13:57:15 | 显示全部楼层
xminchen 发表于 2016-6-27 13:42
咨询一下培养基厂家,开过瓶的干粉怎么保存和保存期。我们一般是封口后放2-8℃。

2-8C不会吸潮结块吗?
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药徒
发表于 2016-6-27 13:59:56 | 显示全部楼层
nunqing 发表于 2016-6-26 16:14
也可能纯化水样品被污染了呢

阴性对照长菌呀,所以和样品没有关系
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药徒
发表于 2016-6-27 16:12:54 | 显示全部楼层
桃花酒仙 发表于 2016-6-22 23:49
这都长得像菌液计数了。。内外都长、分布均匀
1.一般倒平皿时散落的几个CFU菌不会污染成这德行
2.环境污 ...

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药徒
发表于 2016-6-27 16:29:00 | 显示全部楼层
个人感觉是培养基灭菌效果不好的的问题,你都说R2A阴性也是长菌的。若设备原因排出了,可以好好从物料方面逐一排查。
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药徒
发表于 2016-6-27 16:48:43 | 显示全部楼层
基本可以确认是你培养在倒平皿的时候已经污染了。
可以考虑从以下手段排除:
1、灭菌条件确认:(灭菌如果oK的话,理论上来说是OK的。)(概率很低)
2、倒平皿的操作环境:从你口述,其他平皿没有问题,说明环境也是OK的(低概率);
3、确认操作过程;从培养基灭菌结束到培养基倒平皿直至倒置全过程,(据你描述,你有用酒精擦拭内壁瓶口的习惯,不确定是否其他培养基你也有这习惯,理论上来说R2A为低营养培养基,有可能在这地方存在污染。)
4、也许还有我没有想到的地方,你可以考虑下。培养环境基本可以暂不考虑。
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药徒
发表于 2016-6-27 16:51:01 | 显示全部楼层
我提两点啊:
1、你的培养基每次配制有无菌性和灵敏度检查吗?
2、你的操作环境确认一下,最好请验证的同事做个PAO试试?
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药徒
发表于 2016-6-27 16:53:17 | 显示全部楼层
编号⑨⑤②⑦ 发表于 2016-6-22 14:35
没事的,我们一般20min,以前我做过的一个公司他们怕灭菌不彻底灭30min的

你这个要做灵敏度测试过了才行吧!
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药徒
发表于 2016-6-27 16:56:30 | 显示全部楼层
个人认为是环境问题
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药徒
发表于 2016-6-27 23:58:01 | 显示全部楼层
很有可能是培养基的问题,一般环境污染,操作污染不会产生这么大量的菌。
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发表于 2016-6-28 10:07:12 | 显示全部楼层
说的很好----------------
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药徒
发表于 2016-6-28 14:03:03 | 显示全部楼层
换人!!~~~
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药生
发表于 2016-6-28 15:52:12 | 显示全部楼层
165℃2小时的灭菌程序经过验证了吗?
建议购买成品的无菌R2A培养基,自己倒平板的存在污染的风险
你倒的平板有没有做预培养?
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发表于 2016-6-30 15:15:48 | 显示全部楼层
cnosema 发表于 2016-6-27 13:57
2-8C不会吸潮结块吗?

所以要封口。
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药徒
发表于 2016-6-30 17:18:41 | 显示全部楼层
要调查排除的方面很多呀
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药徒
发表于 2016-6-30 17:27:45 | 显示全部楼层
培养基干粉当然会有菌 人家不是无菌试剂。   但是湿热灭菌过程没问题的话是不会长的。     从污染情况来看  要么培养基整个被污染了,要么培养皿没灭好。

做个实验吧  配tsa和r2a各200ml 一锅灭菌    培养皿也一起灭    然后倒平板预培养。
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发表于 2016-7-11 16:41:35 | 显示全部楼层
水会不会有问题?要不就是操作问题
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