求助：液相不出峰是什么原因

wang66 · 发表于 2016-5-5 09:43:56

hongwei2000 发表于 2016-5-4 08:23
信息量太少
首先要确保参数都是正确的
包括仪器是否正常开启

参数设置没有问题，检查符合好几次，以前有做个这个产品，但也是一年前了，图谱和网上参考图基本一致，出目标峰都在13分钟左右，仪器个部件都正常，因换做其他产品都一切正常。流动相配制比例是按照药典配制（1.取1.4ml甲酸（88%）至1000ml量瓶加水至刻度摇匀即可得到0.1%甲酸溶液；2.取0.1%甲酸溶液830ml和乙腈170ml混合摇匀即可），现在做出来的图谱不管是对照品溶液还是供试品溶液出来的峰都是只有目标峰和一些小杂峰峰面积基本都是三位数（放大观察）之外。什么都没有，按照仪器的目标峰峰面积起码有五位数。

wang66 · 发表于 2016-5-5 09:48:58

汉字太少发表于 2016-5-4 08:31
首先，检查电脑界面是否正确(如果用的是二极管阵列检测器，在没有调到对应波长的情况下有可能不显示峰)；
...

这些都做了，我曾经预热机器十分钟待各参数稳定了才开启电脑工作站扫描波长，以前我们也做过这个产品，网上查看论文资料方法得个参数都和药典检测方法一样，目标峰基本都是13分钟左右出峰，仪器应该没问题，因为换成检验其他品种是正常的，柱子也换了好几根，结果问题还是没有改观

wang66 · 发表于 2016-5-5 09:51:02

aswman08 发表于 2016-5-4 08:34
排除因素：
1.仪器：柱压是否正常，是否有气泡积气；管线接头是否漏液；进样针是否堵塞；比例阀是否正常。 ...

柱压都很稳定都基本是在12mpa，柱子也换过好几根，流动相是等度单通道，

wang66 · 发表于 2016-5-5 09:57:23

pussay11 发表于 2016-5-4 09:50
还有，，，你流动相混合均匀了吗？不要问我为什么这么问~~~

若甲醇和乙腈配比倒过来那要考虑PH值
太低了会很伤柱子的，我们这种情况流动相都是在外面配制后混合好超声15分钟后才可以使用的，跑得是等度，用的是单通道

wang66 · 发表于 2016-5-5 09:59:00

onizuka2014 发表于 2016-5-4 12:39
如果流动相没问题，而你机器又正常的情况下，有可能保留时间太长，你走的时间不够哦！你这个比例我有点熟， ...

我有几针对照品溶液跑了2个小时也是一样没出峰，按照以前图谱和网上论文参考资料一般目标峰13分钟左右出峰

汉字太少 · 发表于 2016-5-5 10:27:02

wang66 发表于 2016-5-5 09:48
这些都做了，我曾经预热机器十分钟待各参数稳定了才开启电脑工作站扫描波长，以前我们也做过这个产品，网 ...

你那是紫外检测器吗？

wang66 · 发表于 2016-5-5 11:45:10

汉字太少发表于 2016-5-5 10:27
你那是紫外检测器吗？

是紫外检测器

巴西木 · 发表于 2016-5-5 14:09:13

herui28 发表于 2016-5-4 09:01
真的是信息量太少，没法替你分析

提供的信息量少，需要下一步排查的原因多

巴西木 · 发表于 2016-5-5 14:12:41

波长是330mn？系统适用性试验合格吗？

lp4502888 · 发表于 2016-5-5 14:25:46

说详细点

wang66 · 发表于 2016-5-5 18:48:44

巴西木发表于 2016-5-5 14:12
波长是330mn？系统适用性试验合格吗？

波长是330mn！系统实验是合格的

wang66 · 发表于 2016-5-5 18:51:54

pontifex 发表于 2016-5-5 09:27
除了楼上各位的分析，还有一种可能是目标峰太小，溶剂峰大，在同一坐标下看不出来，放大看看。如果确认有目 ...

放大看见到很多小小杂峰！都是峰面积都是两道三位数！而之前出的目标峰面积基本都是五位数！而且对照品也是新配置

wang66 · 发表于 2016-5-5 18:52:50

车前草检测大车前苷含量

思雅雅 · 发表于 2016-5-5 19:07:20

wang66 发表于 2016-5-5 18:52
车前草检测大车前苷含量

跟2010版的车前草的检验方法一样吗？我做过2010版的，出峰时间也是7分钟左右，柱温是30度吧！车前草杂质比较多的

曦白无常 · 发表于 2016-5-5 19:21:02

氘灯问题？？？？

阿布 · 发表于 2016-5-6 08:16:50

wang66 发表于 2016-5-5 09:26
关键是对照品溶液也是一样，只出溶剂峰，流动相重新配了几次，结果还是一样没有改观

那就应该是供试品的问题啦，换个别的样品试验一下，看有木有样品峰

aswman08 · 发表于 2016-5-6 08:58:25

按照人，机，料，法，环的原则。
人：换个人试试。
机：换台液相试试。
法：药典方法应该没问，检查一下液相设置分析方法是否被改动。
料;已多次重新配液和流动相。
环：没多大关系。
按照评估看，换台液相试试吧。
另按你说的出峰面积几百，安捷伦以外的HPLC或网络版的安捷伦。

A764033500bc · 发表于 2016-5-6 16:24:49

检测器的问题吧？要不就是氘灯能量低了

ylsr1987 · 发表于 2016-5-6 16:32:47

这个很大原因是流动相有问题！

hongwei2000 · 发表于 2016-5-9 08:13:03

wang66 发表于 2016-5-5 09:43
参数设置没有问题，检查符合好几次，以前有做个这个产品，但也是一年前了，图谱和网上参考图基本一致，出 ...

以当时检验的样品为质控
看看是否能够重现
如果不重现
很大的可能是仪器、柱、参数等原因造成的

[分析仪器] 求助：液相不出峰是什么原因

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