请教各位大侠菌种冻干粉的复苏和传代的具体步骤

笨笨熊1225

各位老师、大侠：买的菌种冻干粉是加稀释液和液体培养基稀释（稀释液和培养基是什么？有具体量吗？）后就培养吗？细菌用什么培养基？真菌用什么培养基呢？
本人微生物方面是超级菜鸟，学习中，需要各位

juanx

用75%乙醇清洁安瓿瓶外表面，自然挥发后用酒精喷灯灼烧安瓿瓶四分之一处待灼烧部位通红时，滴加一滴无菌稀释剂让其爆裂，未完全爆裂的用酒精棉球在无菌条件下掰开。用无菌吸管移取1~2ml适宜的液体培养基到安瓿中，轻轻旋转安瓿使冻干菌种和培养基充分混合并完全溶解，用无菌吸管将安瓿内菌液转接到相应的液体（或琼脂）培养基中增菌培养（胰酪大豆胨液体培养基适用于金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌、乙型副伤寒沙门菌、铜绿假单孢菌；沙氏葡萄糖液体培养适用于白色念珠菌；沙氏葡萄糖琼脂培养基适用于黑曲霉；硫乙醇酸盐流体培养基适用于梭状芽孢杆菌等厌氧微生物），分别进行增菌培养后，观察液体培养基是否浑浊或斜面是否长菌，来说明菌种的复活生长情况；若不浑浊或不长菌，丢弃前应灭菌处理并详细记录菌种传代、领用记录。
除另有规定外，细菌在30~35℃培养18~24小时，酵母菌在20~25℃培养24~48小时，霉菌在20~25℃培养72小时。
新手爆裂掌握不好危险。自己用砂轮划划，掰开。

liangliangliu12

好好学习一下，谢谢

ywz

怎么没人。。我也想学习下

wangwenji

可以参考一下药典微生物检测部分

xiaomi0505

2015版药典 非无菌产品微生物计数法 中明确规定了，例如金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、大肠埃希菌用TSA进行传代保存，白色念珠、黑曲霉用SDA

戴木木

我们一般都是加相应培养基来溶解，例如2ml,

lujiejin2011

juanx 发表于 2016-8-23 10:26
用75%乙醇清洁安瓿瓶外表面，自然挥发后用酒精喷灯灼烧安瓿瓶四分之一处待灼烧部位通红时，滴加一滴无菌稀 ...

不错，谢谢分享，受教了