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[药典讨论] 有做过培养基适用性的小伙伴过来讨论一下吧

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发表于 2016-1-21 09:30:36 | 显示全部楼层 |阅读模式

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大家把遇到的问题都说一说吧,我们来讨论一下,集思广益嘛,主要是想寻求高手的指点啦
我这段时间一直在做,主要是金黄色葡萄球菌,大肠埃希菌,枯草芽孢杆菌和铜绿假单胞菌这几种。主要问题出在菌液制备这里,相信不少小伙伴也存在这样的问题吧。我用的是与标准比浊管浊度对照的比浊法来调整菌液浓度的,比浊后按照理论浓度逐级做10倍稀释(用移液器,200ul→2000ul),直到浓度为1000ul/ml,然后接种100ul涂布,但是基本长出来菌落都不理想,每次菌落数差很多,比理论少很多,并且平行性差。开始以为是移液器的误差,换成校验合格的移液器问题有所改善但是还是不好。为了排除菌悬液不匀的情况,几乎做到时时振摇了,接种的结果还是差很多。现在有种无计可施的感觉,小伙伴们快来帮我理理思路吧,到底是哪里出了问题,万分感谢
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药徒
发表于 2016-1-21 11:02:24 | 显示全部楼层
涡旋振荡器,尽量打散菌液
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药徒
发表于 2016-1-21 11:11:29 | 显示全部楼层
无QC经验,路过学习!
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 楼主| 发表于 2016-1-21 16:25:45 | 显示全部楼层
window 发表于 2016-1-21 11:02
涡旋振荡器,尽量打散菌液

是为了不结块吗?涂布出来的没有成片的菌落了。
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药徒
发表于 2016-1-21 17:27:00 | 显示全部楼层
No.~白菜 发表于 2016-1-21 16:25
是为了不结块吗?涂布出来的没有成片的菌落了。

是为了菌悬液菌体分散更好,更均匀
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 楼主| 发表于 2016-1-22 09:21:52 | 显示全部楼层
window 发表于 2016-1-21 17:27
是为了菌悬液菌体分散更好,更均匀

用移液器混匀,或者震荡混匀真的会差那么多吗?
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药徒
发表于 2016-1-22 10:24:15 | 显示全部楼层
No.~白菜 发表于 2016-1-22 09:21
用移液器混匀,或者震荡混匀真的会差那么多吗?

呵呵额,差别你做了就知道
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 楼主| 发表于 2016-1-22 11:35:45 | 显示全部楼层
window 发表于 2016-1-22 10:24
呵呵额,差别你做了就知道

好吧,那我用小试管2ml液体能混得开不?
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药徒
发表于 2016-1-22 12:53:12 | 显示全部楼层
No.~白菜 发表于 2016-1-22 11:35
好吧,那我用小试管2ml液体能混得开不?

可以的,充分涡旋振荡
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发表于 2016-1-25 11:19:42 | 显示全部楼层
我们用涡旋振荡器,然后10倍稀释至10的-8,菌落计数每毫升小于100cfu。
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发表于 2016-1-25 11:20:38 | 显示全部楼层

比较残酷,微生物的不是很懂
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发表于 2016-1-26 18:35:38 | 显示全部楼层
长知识了,谢谢!
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