臭氧验证讨论

gmp977

谁做过臭氧熏蒸验证呀，生物挑战做了吗，用何数量级的什么菌呀，效果如何，能降几个数量级呢

大呆子

没做过

大呆子

2．臭氧消毒验证的要点
臭氧消毒效果的验证中需确认和校准的臭氧发生器技术指标主要有臭氧产量、臭氧浓度
和时间定时器，并通过最终检查细菌数来确定消毒时间。

常用的消毒效果验证主要有指示剂试验和表面污染试验等方法。
1．用生物指示剂进行细菌挑战性试验
生物指示剂(BI)菌种可选用枯草芽孢杆菌孢子，在使用前要测定其初期菌数，应不少于
10 个。
在消毒灭菌前，将装有BI 表面皿置于各被测房间内的中央地面，灭菌前打开表皿，灭菌
结束后，回收BI 放人大豆酪素消化液体培养基中，在37℃下培养3 天，看细菌是否被杀灭。
若没有细菌生长，则为合格。
2．表面污染试验
表面微生物污染试验的方法主要有真空吸引法、培养皿接触法(RodacPlate 取样法)、棉签
擦抹法和浸渍法等。
(1)真空引吸法
使吸引喷嘴接近需检查的表面，随同空气吸引附着于物体表面的粒子，并用无菌的薄膜
过滤器过滤，以任何方式进行培养，从而测得细菌的数量。此方式在药品生产企业用得较少。
(2)培养皿接触法
培养皿接触法(Rodac Plate 法)最为简单，但仅适用于平的表面。盘内灭菌的琼脂 (通常直
径为50mm)直接与设备表面接触，然后加盖在预定时间内和规定温度下(例如
30～35℃或20～25℃)进行培养，用肉眼对微生物计数并识别，如必要还得鉴别菌种。此方法
要求将培养基倒人培养皿中并使之隆起，要做到这一点操作上比较困难。
(3)棉球擦抹法
这是一种简单可行的方法，为制药企业普遍采用。消毒结束后，可对洁净室内的机械表
面＼内部及缝隙间、墙壁、窗台、试验台等表面的一定面积，用事先经过灭菌的生理盐水、
精制水或缓冲液(例如磷酸缓冲生理盐水)润湿的适当大小的灭菌纱布或灭菌脱脂棉充分擦
拭，然后放人广口瓶，加一定量浸出液振摇(或作超声波洗涤)，再对浸出液进行菌的培养。
棉签取样能用于Rodac 盘无法进行取样的场合，例如角落、缝隙等处。棉签可以由棉花
和涤纶制成。如果棉签是由海藻酸钙做成的那就最好不过，因为这种材料可溶于稀释液，这
样便于将微生物释放在溶液中。
(4)浸渍法
棉签先用灭菌稀释液(如注射用水)湿润，然后擦拭取样区域，最后放人到一个装有经预测
试的灭菌稀释液的试管中。样品应尽快进行测试，以免在稀释液中增加微生物数量。试管经
搅动从棉签上释放出微生物，稀释液则注入培养基盘内，经培养，然后计数并鉴别。

大呆子

参考吧，２００３验证指南

gmp977

你们就这样做了吗，有实效吗

catchupmo

我做过，之前要计算浓度和维持时间。
我们做的效果一般，可能还是跟空调设计有关，有的点很好（要求是至少下降3个对数单位），有的点2个对数单位都不到（用枯草芽孢试纸条，消毒之前之后进行计数）；延长时间后，勉强合格。如果用金葡做（自己做皿），下降3个对数单位没问题。
供参考。

gmp977

楼上的你好，你们做此验证时环境参数控制的是多少呀，臭氧浓度是要分环境级别来确定吗，谢谢

catchupmo

楼上的：环境湿度要求70%，其它主要是通风时间、密闭时间等；臭氧浓度不分级别，一般要求 60mg/m3 。
以上要求可见<消毒技术规范>2002年版。

gmp977

浓度那么高吗，2003验证指南79页上示例中浓度是20呀，你们高出3倍呀，这样是不是太高了呀

gmp977

空气消毒：臭氧对空气中的微生物有明显的杀灭作用，采用20mg/m3 浓度的臭氧，作用 30min，对自然菌的杀灭率达到90% 以上。

    用臭氧消毒空气，必须是在封闭空间，且室内无人条件下进行，消毒后至少过 30min 才能进入。可用于手术室，病房，工厂无菌车间等场所的空气消毒。

   (5) 表面消毒：

    1)用臭氧气体消毒，臭氧对物品表面上污染的微生物有杀灭作用，但作用缓慢，一般要求 60mg/m3 ，相对湿度 ≥70%，作用 60 min～120min 才能达到消毒效果。

我看到了，两种浓度要求呀，我们制药企业都选60mg/m3 的吗

gmp977

60浓度的挑战能成功，并且有的还要加长时间，那20浓度的是不是挑战就是不能成立呀

lvjiancheng

gmp977 发表于 2012-2-9 12:03
浓度那么高吗，2003验证指南79页上示例中浓度是20呀，你们高出3倍呀，这样是不是太高了呀

看看你们说的是一个单位吗？

lvjiancheng

catchupmo 发表于 2012-2-7 10:27
我做过，之前要计算浓度和维持时间。
我们做的效果一般，可能还是跟空调设计有关，有的点很好（要求是至少 ...

维持时间是什么指标啊？
浓度我们有专门的仪表，我们用过

gmp977

是一个单位，时间是通臭氧的时间

catchupmo

别的企业不晓得，我们是选择了60。设备犄角旮旯里面的地方也希望消消毒。所以就按这个选择了。

gmp977

catchupmo 发表于 2012-2-9 13:03
别的企业不晓得，我们是选择了60。设备犄角旮旯里面的地方也希望消消毒。所以就按这个选择了。

请问一下70%的湿度高效过滤器能承受吗？因为消毒技术规范中说臭氧消毒湿度要达到70%的呀，盼回复

豚鼠

gmp977 发表于 2012-2-15 09:33
请问一下70%的湿度高效过滤器能承受吗？因为消毒技术规范中说臭氧消毒湿度要达到70%的呀，盼回复

能承受

gmp977

你们真实施了吗，我刚问过我们设备部人员，他们说湿度达70%会击穿高效呀

catchupmo

gmp977 发表于 2012-2-15 09:38
你们真实施了吗，我刚问过我们设备部人员，他们说湿度达70%会击穿高效呀

俺真做了。一开始就说俺真做了。俺做过甲醛、臭氧、喷雾（过氧乙酸）。VHP没做过，太贵，公司不买。

轰天乌驹

路过，学习了