最近做了一个实验，大家帮我分析

大呆子

    检测物质为补骨脂素（保留时间为14分多钟的），在红圈中有一个杂质峰，该杂质峰在第一二针都分离的很好，但越往后，分离效果就越差，每次实验都呈如些规律。大家帮忙分析是什么原因？

秦无醉

也许不是分离好不好的问题。
楼主有柱温箱吗，温度控制很重要。补骨脂素和异补骨脂素都对温度比较敏感。
第1和第2张图谱保留时间相差在0.5分以上。而第2图的杂质峰刚好在第1图的后面主峰位置，也许没被分离出来，参与到异补骨脂素峰中了。
看楼主的图谱不是每个都在固定时间进针，应该不是自动进样，而且楼主说有规律性，排除了上一针遗留杂质的可能。
第2、第3异补骨脂素峰，保留时间相差达1分多钟，楼主。该加个保温箱了。

华佗

这个对结果有影响吗？也许这不是供试液带来的杂质！

lifire530

1、色谱仪运行是否稳定；
2、运行时间是否足够，能把主峰后的杂质冲出不带入下一针；
3、可以尝试稍微减小3-5%的流动相中有机成分比例。

xiaxia-0919

个人意见仅供参考：
1、由于杂质累计导致分离不彻底，中药产品最好加保护柱，或者每一次走完针后稍微调整流动相比例，使其洗脱能力变强一点，洗几分钟（最好走完一针）后再恢复到流动相，平衡几分钟后进样；
2、或者干脆每进完一针后空走或流动相进一针
3、这种问题常见，主要体现在中药产品

秦无醉

靠，楼主等我评完了，又打乱了图谱顺序。
玩捉迷藏呢

大呆子

有柱温箱，25度

我想按小小说的方法，中间用甲醇清洗，由于时间不够，所以没有去做。

这种现象每次都检测都会有

大呆子

第一个图，补骨脂素与异补骨脂素之间的一个小峰分离的很好

越到后面进样的，分离的越差

雪锋

没做过检验不好评论

xiaxia-0919

大呆子 发表于 2011-12-15 09:59
有柱温箱，25度

我想按小小说的方法，中间用甲醇清洗，由于时间不够，所以没有去做。

应该是药典品种吧，流动相是改变不了的，所以只能在样品走完针后想办法呵呵

大呆子

磷酸盐缓冲液（取0.1mol/L磷酸氢二钠溶液，用磷酸调节pH值至7.0）-甲醇（45:55）为流动相；检测波长为246nm。理论板数按补骨脂素峰计算应不低于3000。

秦无醉

xiaxia-0919 发表于 2011-12-15 09:54
个人意见仅供参考：
1、由于杂质累计导致分离不彻底，中药产品最好加保护柱，或者每一次走完针后稍微调整流 ...

在线调整流动相不现实，可以考虑每针尽量延长时间，主要是加大了检测时间和成本。
中药杂质太多了。不好说。
柱温箱并不能完全解决温度敏感问题，流动相饱和充分没有。最好环境温度也要控制好。现在早上和下午温差太大。

liqinglin

我在同xiaxia-0919观点，其实不是你这个样存在这个问题，所有的都存在这个问题，
柱子的分离能力越来越差，除非注两针后，洗脱柱子，平衡后再注。

大呆子

秦无醉 发表于 2011-12-15 10:08
在线调整流动相不现实，可以考虑每针尽量延长时间，主要是加大了检测时间和成本。
中药杂质太多了。不好 ...

开空调的

于海峰

药品品质，流动相都有可能，很难确定

爱家奔奔

我没有做中药的检测经验，不知道降低供试液的检测浓度或者进样体积，是否有效？分离效果降低的根本原因是柱子的上杂质过载，而流动相的洗脱能力有限。

了了.

同意xiaxia-0919的说法。

新源GMP

大呆子 发表于 2011-12-15 10:00
第一个图，补骨脂素与异补骨脂素之间的一个小峰分离的很好

越到后面进样的，分离的越差

咱不是作分析的。提点外行的建议。

1、考虑一下是否有上个样品在柱中残留；
2、考虑一下样品本身的稳定性，这里有个时间先后顺序。你那个出小峰的物质随时间变化会降解吗？

咕咕

同意小小的说法。
在单泵的液相测也有这种情况吗？

xiaxia-0919

咕咕 发表于 2011-12-15 11:36
同意小小的说法。
在单泵的液相测也有这种情况吗？

我不是小小