面积归一方法验证

酒肆94

最近审阅一份检测起始物料一个杂质的方法验证报告，面积归一化话计算杂质I含量，杂质I没有对照品，他给的验证过程是：1，配制低浓度供试品溶液，面积归一化法计算出杂质I占比，计算杂质I浓度；

2，反推出当杂质I达到限度浓度时的供试品浓度并配制该高浓度供试品溶液，作为对照品溶液；
3，将该对照品溶液稀释至信噪比大于3,和10分别作为LOD,LOQ。
以此验证LOD,LOQ达到要求，该方法适用于检测。
我认为是用未知准确性的方法计算得到的LOD,LOQ度依旧是未知的,是十分不合理的，专属性也只走了一针供试品溶液，也并不能直接定位证明该杂质I。（跟死循环一样）
个人建议直接用主成分做LOD,LOQ。

机智鼠

在药学和医疗器械领域，方法验证是确保分析方法准确性、可靠性和有效性的关键步骤。针对面积归一化法计算杂质I含量的情况，确实存在一定的合理性问题。首先，面积归一化法基于所有组分均能被检测且响应因子相似的假设，这在没有杂质I对照品的情况下难以保证。因此，通过此法得到的LOD和LOQ值的准确性存疑。

根据相关药典规定（如《中国药典》2020年版四部通则0512），LOD和LOQ的测定应直接使用待测物质的标准溶液进行，以确保结果的准确性和可靠性。此外，专属性验证仅使用一针供试品溶液是不够的，应考虑更多实验证据来支持杂质I的定位和定量。

综上所述，建议重新评估该方法的适用性，并考虑使用主成分直接进行LOD和LOQ的测定，同时加强专属性验证，以确保分析方法的科学性和合规性。

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酒肆94

讨论后说，只需要确认杂质I的检出能力，对其浓度准确性不做要求。所以在假设该方法准确性的前提下，按面积归一化法计算供试品溶液中杂质I的浓度是5ug/ml，限度浓度是2.5ug/ml，稀释至S/N>3(0.5ug/ml)时有响应，来确定有检出能力就行。

依然星期三

面积归一法的方法确认很难搞的

门门

酒肆94 发表于 2024-9-20 10:46
讨论后说，只需要确认杂质I的检出能力，对其浓度准确性不做要求。所以在假设该方法准确性的前提下，按面积 ...

这么解释挺好的，有点道理。
但是，不制备出来些杂质，显得你们合成人员的本事不行啊。不够高大上。检验制备出来纯杂质，然后按外标法研究，当然最后定方法可以面积百分比。这样才能显得高大上。

416301116

最简单的解决方法就是获得杂质I对照品。否则无论怎么设计验证方案，都很难证明该方法对杂质I检测的结果是可重复且准确的。基于当前的设计，大家心里都是清楚的，不过自自欺欺人而已。

Luckyboy12

面积归一法本来属于半定量的方法....