求助：液相色谱检测对照品和供试品出峰时间均在跑梯度时间范围外时什么原因？

我想我可以 · 发表于 2016-1-20 11:16:27

你可以加大点的甲醇浓度看看能不能提前出峰，如果提前出峰分离度没有问题的话就可以的了，你过了梯度再出的峰可能不能用于计算得，因为系统不默认。

wang66 · 发表于 2016-1-22 09:45:55

我想我可以发表于 2016-1-20 11:16
你可以加大点的甲醇浓度看看能不能提前出峰，如果提前出峰分离度没有问题的话就可以的了，你过了梯度再出的 ...

曾经加大过甲醇的比例，但结果还是没有什么改变

我想我可以 · 发表于 2016-1-22 11:14:13

wang66 发表于 2016-1-22 09:45
曾经加大过甲醇的比例，但结果还是没有什么改变

那你只能延长停止时间或者改短柱子看看，如果短柱子峰分离度和理论塔板数都好的话就可以用了。

stupid22273 · 发表于 2016-1-24 15:22:45

液相梯度延时了？做个梯度误差确认一下。

chenblue · 发表于 2016-1-26 08:19:11

具体情况具体分析吧，细辛马兜铃酸的方法梯度时间是40分钟，其实35分钟到40分钟是53%乙腈升高到100%，理论上应该已经是主峰出峰完毕，进行色谱柱清洗步骤了，考虑到系统的延迟，马兜铃酸保留时间应该在40分钟以前，如果楼主发现保留时间已经超过40分钟很多，可能是你所用的色谱柱太长或者填料保留太强导致，建议更换色谱柱，一种是换较短的色谱柱（原来用25cm可以换15cm的），另一种是换保留相对弱的色谱柱（载碳量较低的，可以咨询厂家），这两种方式的前提是能满足系统适用性要求，且马兜铃酸峰能得到良好分离。
个人判断马兜铃酸出峰时间应该是在31-35分钟的53%乙腈这段，否则这段等度就没意义了。一旦待测组分出峰完毕，个人偏好是梯度直接可以进入色谱柱清洗步骤，无需再弄个几分钟的等度来拖延时间。

wang66 · 发表于 2017-4-24 17:53:02

chenblue 发表于 2016-1-26 08:19
**** 作者被禁止或删除内容自动屏蔽 ****

你的判断是正确的，非常感谢你的回答，确实实在31-35分钟出峰，但是峰确实太小，基本是平滑曲线，因为我进高浓度对照品溶液时，在这段时间里有这个大的主峰，但是进工作对照品溶液的时候基本上没见到峰，都是一条平滑线。

wang66 · 发表于 2017-4-24 17:54:05

我想我可以发表于 2016-1-22 11:14
那你只能延长停止时间或者改短柱子看看，如果短柱子峰分离度和理论塔板数都好的话就可以用了。

柱子我用的是C18 150*4.6mm

[分析仪器] 求助：液相色谱检测对照品和供试品出峰时间均在跑梯度时间范围外时什么原因？