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红花薄层鉴别

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发布时间: 2024-12-5 14:30

正文摘要:

最后两个点是供试品,真的想知道啥原因会造成斑点这样

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深海12345 发表于 2024-12-9 10:11:44
可能与样品中红花的提取方式有关,羟基红花黄色素A不稳定,易降解。之前配的红花对照药材储备液,放置一段时间羟基红花黄色素A就没有了
ALPACA 发表于 2024-12-5 14:44:53
这张图片显示的是红花薄层色谱(TLC)鉴别结果。出现这样的斑点可能有以下几种原因:

### 一、样品制备问题
1. **提取不完全**
   - **原因**:如果在提取供试品时,提取方法不当或提取时间不够,可能导致有效成分提取不完全。红花中的主要成分如羟基红花黄色素A等可能没有被充分提取出来,从而影响斑点的形成。
   - **解决方法**:可以尝试优化提取方法,例如增加提取溶剂的用量、延长提取时间或采用更有效的提取技术(如超声提取、微波辅助提取等)。
2. **杂质干扰**
   - **原因**:在提取过程中,如果样品中含有较多杂质,这些杂质可能会与有效成分一起被提取出来,干扰薄层色谱的结果。例如,样品中的蛋白质、多糖等杂质可能会在薄层板上形成拖尾或模糊的斑点。
   - **解决方法**:可以在提取后增加净化步骤,如采用柱层析、液 - 液萃取等方法去除杂质,提高供试品的纯度。

### 二、薄层色谱操作问题
1. **点样问题**
   - **原因**:
     - **点样量过大**:如果点样量过大,样品中的成分在展开过程中不能很好地分离,会导致斑点扩散、拖尾或重叠。
     - **点样不均匀**:点样时如果操作不规范,导致样品在薄层板上分布不均匀,也会影响斑点的形状和分离效果。
   - **解决方法**:
     - 控制好点样量,一般点样量以几微升为宜,可以通过稀释样品或多次点样(每次点少量,待溶剂挥发后再点下一次)来控制点样量。
     - 采用合适的点样工具(如微量进样器),并确保点样操作平稳、均匀。
2. **展开剂问题**
   - **原因**:
     - **展开剂选择不当**:如果展开剂的极性与样品中成分的极性不匹配,会导致成分不能很好地分离。例如,展开剂极性过大,可能使所有成分都随溶剂前沿移动,形成拖尾或无法分离的斑点。
     - **展开剂比例不合适**:即使展开剂种类选择正确,但各溶剂的比例不合适,也会影响分离效果。
   - **解决方法**:
     - 根据样品中成分的极性特点,选择合适的展开剂体系。对于红花,可以参考相关文献或标准,选择合适的展开剂。
     - 通过预试验,调整展开剂中各溶剂的比例,优化展开条件,以获得良好的分离效果。
3. **薄层板问题**
   - **原因**:
     - **薄层板质量不佳**:如果薄层板的吸附剂涂布不均匀、硅胶颗粒大小不合适或板本身有损坏,都会影响色谱结果。
     - **薄层板活化不当**:薄层板在使用前需要进行活化处理,如果活化温度或时间不合适,会影响吸附剂的活性,进而影响分离效果。
   - **解决方法**:
     - 使用质量可靠的薄层板,或者自行制备薄层板时,严格控制涂布工艺,确保吸附剂均匀分布。
     - 按照薄层板的类型和要求,正确进行活化处理,一般硅胶板可在105 - 110℃下活化30分钟左右。

### 三、检测条件问题
1. **显色剂问题**
   - **原因**:
     - **显色剂选择不当**:如果显色剂与样品中成分不反应或反应不灵敏,可能导致斑点显色不清晰或无法显色。
     - **显色剂浓度或用量不合适**:显色剂浓度过高或过低,用量过多或过少,都可能影响显色效果。
   - **解决方法**:
     - 根据红花中成分的特性,选择合适的显色剂。例如,红花中的黄酮类成分可以用三氯化铝等显色剂进行显色。
     - 通过预试验,调整显色剂的浓度和用量,确保显色效果良好。
2. **观察条件问题**
   - **原因**:
     - **观察光源不合适**:如果观察薄层色谱结果时使用的光源不合适,可能无法清晰地看到斑点。例如,在紫外灯下观察时,紫外灯的波长、强度等会影响斑点的可见度。
     - **背景干扰**:观察环境中的背景光或其他干扰因素,可能会影响对斑点的观察。
   - **解决方法**:
     - 选择合适的观察光源和条件,如根据显色剂的激发波长选择合适的紫外灯,并确保观察环境的黑暗和稳定。
     - 尽量减少背景干扰,可采用遮光罩等设备来改善观察条件。

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