纯化水微生物薄膜过滤法

@王不留行

在纯化水微生物限度时遇到非常棘手的问题，我做了几批纯化水，同时又用娃哈哈纯净水同法操作，结果纯化水整张滤膜都长满了菌，而娃哈哈纯净水没长菌，我认为操作方法没问题，后来将水送到检测中心结果才28cfu/ml，再后来我一直检测还是长满了菌哪一个环节出现了问题？
操作方法:取纯化水1ml（没有稀释，没有用缓冲液冲洗）经薄膜过滤，用R2A培养基35摄氏度培养五天，
结果如图片

纯化水培养结果

同条件、同时间、同法操作娃哈哈纯净水没有长菌

@王不留行

greatwolf 发表于 2024-8-28 14:42
你做的水，和送检测中心的水不是同一时间的，不是同一储存条件的，没有直接对比性，只有参考作用。娃哈哈的 ...

是同一时间取水，我同时做的，图片只是参考出来的结果，每一次做出来和图片都差不多

@王不留行

小铁犇 发表于 2024-8-28 14:43
不是同时取的水很难判断呢

送检是同一时间取水，我同时做的，图片只是个例子但是我每一次做出来和图片都差不多

@王不留行

156067 发表于 2024-8-28 14:49
一般得逐步排查，器具灭菌、灭完后的保护措施、取水过程、检验过程、培养基污染、培养过程，建议回忆一下细 ...

娃哈哈是后测的，那正确的操作步骤是什么，要不要冲洗

@王不留行

jshafei 发表于 2024-8-28 14:57
滤器有没有污染，培养基的问题有没有，还有1ml不冲洗可以么

1ml水用多少缓冲液冲洗好，在抽滤时要不要用冲洗液润湿滤膜

@王不留行

156067 发表于 2024-8-28 15:12
虽然药典没有强制要求，但一般都是建议冲洗的，可以帮助更好润湿整个滤膜以及微生物更均匀的分布在滤膜上 ...

可不可以留个联系方式，向你请教

@王不留行

Qiuyang08301340 发表于 2024-8-28 15:43
要加缓冲液的，pH 7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或0.9%氯化钠溶液

1ml水用多少缓冲液冲洗较好

@王不留行

destino7 发表于 2024-8-28 15:46
5加95无菌水，混匀，然后取20呢？

这样如何计数，是5ml水加95ml无菌水，过滤在冲洗吗

@王不留行

机智鼠 发表于 2024-8-28 15:02
纯化水整张滤膜长满菌，可能原因有：纯化水系统存在污染源，或样品处理过程中受到污染。建议检查纯化水系统 ...

操作方法应该没问题，做过多次对照验证的，检测中心报告水合格，但是我做的就不合格，而且是经过多次对照试验的，公司只相信检测中心的，但是事实是我认为是菌是超标的。

@王不留行

Qiuyang08301340 发表于 2024-8-28 15:49
我公司这边是取1ml的纯化水加入到100ml的稀释液(0.9%无菌氯化钠溶液)中，混匀，过滤制得滤膜，菌面朝上贴 ...

这样操作计数是直接报告菌落个数吗

@王不留行

thinkpower 发表于 2024-8-28 15:30
个人感觉就是水不行

但是检测中心报告的是合格的，我也认为是水不行

@王不留行

destino7 发表于 2024-8-28 16:05
这样1ml的菌分布是不是可以散开一些，好查数

是的，那这样计数是直接报告菌落个数吗

@王不留行

microgan 发表于 2024-8-28 17:06
1. 采用薄膜过滤法的本意是对水样进行浓缩，如果按送检的结果能达到28cfu/ml，都可以直接进行混平板法检测 ...

是的，我也用直接涂布方法做了，取1ml涂布培养，结果多不可计

@王不留行

microgan 发表于 2024-8-28 17:06
1. 采用薄膜过滤法的本意是对水样进行浓缩，如果按送检的结果能达到28cfu/ml，都可以直接进行混平板法检测 ...

涂布法培养结果

@王不留行

microgan 发表于 2024-8-28 17:14
那水质不过关呀，要获得准确结果，稀释平板法就可

所以检测中心的28cfu/ml结果真的可信吗

@王不留行

@王不留行 发表于 2024-8-28 17:15
所以检测中心的28cfu/ml结果真的可信吗

其实可不可信我也没办法，因为检测中心就是权威大家只看权威，所以公司直接否定我的结果

@王不留行

microgan 发表于 2024-8-28 17:18
所谓检测中心那也是人做的，如果也是采用薄膜过滤法肯定不可信，要相信自己

公司直接否定我的检测结果，大家一致认同检测中心

@王不留行

greatwolf 发表于 2024-8-28 17:18
如果是这个样子的话，因为你自己的和检测中心的都有检出，只是检出量差异巨大。考虑两方面：
①你的检测 ...

我们的纯化水系统，只有臭氧消毒，臭氧直接打到管道30min，再循环清洗，我的取样容器污染概率也不大，我把矿泉水直接倒入容器内，结果就是没长

@王不留行

microgan 发表于 2024-8-28 17:22
那就是你的专业和权威还不够，并不是外检的都是对的。

作为一名普通的检验员，我确实没什么权威

@王不留行

microgan 发表于 2024-8-28 17:27
因为你的结果并没有展现出一致性和重现性，别人怀疑可以理解。薄膜过滤法有其方法的局限性，你这个水样稀 ...

所有的方法都是参考药典，大家普遍使用薄膜过滤法，平板直接接种法也可以操作但是规定就是薄膜过滤法