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日志

细胞培养1

已有 192 次阅读2023-10-11 14:50 |个人分类:生物制药

图片Q&A系列专题♀问题目录
126细胞悬浮培养和贴壁培养的区别是什么?
127细胞出现结团的原因是什么?
128为什么细胞培养后期细胞直径会逐渐变大?
129动物细胞、细菌、病毒的直径范围一般是多少?
130一般动物细胞培养摇床的二氧化碳该如何控制?

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问题126 细胞悬浮培养和贴壁培养的区别是什么?



答:如下
  • 贴壁培养:是指细胞贴附在一定的固相表面进行的培养。贴壁依赖型细胞在培养时要贴附于培养(瓶)器皿壁上,细胞一经贴壁就迅速铺展,然后开始有丝分裂,并很快进入对数生长期。一般数天后就铺满培养表面,并形成致密的细胞单

  • 悬浮培养:指的是一种在受到不断搅动或摇动的液体培养基里,培养单细胞及小细胞团的组织培养系统,是非贴壁依赖性细胞的一种培养方式。某些贴壁依赖性细胞经过适应和选择也可用此方法培养。增加悬浮培养规模相对比较简单,只要增加体积就可以了。深度超过5mm,需要搅动培养基,超过10cm,还需要深层通入CO2和空气,以保证足够的气体交换。通过振荡或转动装置使细胞始终处于分散悬浮于培养液内的培养方法

             

问题127 细胞出现结团的原因是什么?



答:如下
  • 一般细胞出现结团现象与细胞株、宿主细胞驯化、所用培养基、培养条件有关

  • 出现严重结团的细胞可加入适量的抗结团(ATA),但加入抗结团的生产工艺需要对残留进行评估或者检测

            

问题128 为什么细胞培养后期细胞直径会逐渐变大?

答:如下渗透压增加,随着补料的添加,渗透压会逐渐增加,比如从270到400左右,在渗透压增加的前十几分钟到半个小时,细胞直径会变小,因为渗透压的升高会有一个变化,之后会有一个反馈机制,反而细胞直径会变大

  • 细胞器变大,例如线粒体体积变大,可提供更多的ATP,满足细胞生长和代谢产物合成的能量需求

             
问题129 动物细胞、细菌、病毒的直径范围一般是多少?

答:如下
  • 动物细胞直径约为10~30μm

  •  真核生物一般在微米级,霉菌(2~10μm、真菌(2~30μm

  • 细菌绝大多数细菌的直径大小在(0.5~5μm之间, 放线菌0.1μm

  • 病毒多数病毒直径在100nm(20~200 m),较大的病毒直径为(300-450nm,较小的病毒直径仅为(18~22)nm 

             
问题130 一般动物细胞培养摇床的二氧化碳该如何控制?

答:如下
  • 培养箱中会有测试二氧化碳浓度的红外探头,会根据已设置的PID来进行控制二氧化碳浓

  • CO2既是细胞回代谢产物,也是细胞所需成分,它主要与维持培养液的pH有直接关

  • 培养箱中CO2浓度设定与培养液中NaHCO3浓度有关,常规动物细胞培养二氧化碳浓度设定在5%~10%范围


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